英文標(biāo)題：Pharmacological inhibition of PSPH reduces serine levels and epileptic seizures
中文標(biāo)題：磷酸絲氨酸磷酸酶(PSPH)的藥理學(xué)抑制可降低絲氨酸水平并減少癲癇發(fā)作
發(fā)表期刊：nature chemical biology
影響因子：13.7
客戶單位：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所
百趣提供服務(wù)：600MRM(現(xiàn)升級(jí)為AQ700高通量靶標(biāo)定量)
研究背景
顳葉癲癇(TLE)是最常見(jiàn)的難治性癲癇類型，降低N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)配體水平被認(rèn)為是治療TLE的潛在策略。D-絲氨酸可激活海馬體中的突觸NMDAR，但它對(duì)癲癇發(fā)作的影響尚不明確。
中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所許琪教授團(tuán)隊(duì)在nature chemical biology上發(fā)表了題為“Pharmacological inhibition of PSPH reduces serine levels and epileptic seizures”的研究文章。研究發(fā)現(xiàn)：清除D-絲氨酸或阻斷其與NMDAR的結(jié)合可抑制小鼠模型的癲癇發(fā)作。星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的 L-絲氨酸通過(guò)磷酸絲氨酸磷酸酶(PSPH)調(diào)控胞外D-絲氨酸水平和癲癇發(fā)作活性，據(jù)此研究人員鑒定出一種強(qiáng)PSPH抑制劑Z218484536，該抑制劑可減少TLE小鼠模型和TLE食蟹猴模型的自發(fā)性癲癇放電。
這些結(jié)果表明PSPH是治療TLE的潛在治療靶點(diǎn)，支持Z218484536進(jìn)一步的臨床前研究。
研究結(jié)果
01 D-絲氨酸對(duì)海人酸(KA)誘導(dǎo)的急性癲癇發(fā)作至關(guān)重要
已知D-絲氨酸是海馬體突觸NMDAR的主要共激動(dòng)劑，但它在TLE中的具體作用尚未明確。
為厘清這一問(wèn)題，研究人員首先分析了臨床樣本：對(duì)比非TLE 捐贈(zèng)者、無(wú)海馬硬化(HS)的TLE患者及有HS的TLE患者的海馬組織，發(fā)現(xiàn)有HS的TLE樣本中，谷氨酸和絲氨酸水平顯著高于正常樣本和無(wú)HS的TLE樣本，而甘氨酸水平在各組間無(wú)差異(圖1a-c)。
隨后，研究人員建立KA誘導(dǎo)的TLE小鼠模型，單側(cè)海馬注射KA 4周后，小鼠海馬體中的L-絲氨酸和D-絲氨酸水平均較對(duì)照組明顯升高(圖1d-g)。
為明確D-絲氨酸對(duì)癲癇發(fā)作的直接影響，研究人員另向清醒小鼠單側(cè)海馬注射7ng KA，成功誘導(dǎo)出多次非驚厥性癲癇發(fā)作(少數(shù)小鼠出現(xiàn)驚厥性發(fā)作，圖1h)；在此基礎(chǔ)上進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn)：
1.補(bǔ)充低劑量D-絲氨酸后，癲癇發(fā)作潛伏期顯著縮短，發(fā)作次數(shù)和持續(xù)時(shí)長(zhǎng)明顯增加(圖1i-k)；
2.注射D-氨基酸氧化酶(DAAO)降解體內(nèi)D-絲氨酸，可幾乎完全抑制KA誘導(dǎo)的急性癲癇發(fā)作，而熱滅活的DAAO(hiDAAO)無(wú)此效果(圖1i-m)；
3.使用NMDAR甘氨酸調(diào)節(jié)位點(diǎn)拮抗劑7-氯犬尿氨酸(7-CKA)阻斷D-絲氨酸與NMDAR的結(jié)合，同樣能抑制癲癇發(fā)作，且甘氨酸本身無(wú)促癲癇作用(排除了7-CKA通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)甘氨酸發(fā)揮作用的可能)；
4.特殊情況下，補(bǔ)充高劑量D-絲氨酸反而會(huì)抑制癲癇發(fā)作(圖1i-m)，這一現(xiàn)象與高劑量D-絲氨酸競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合NMDAR的谷氨酸結(jié)合位點(diǎn)有關(guān)，屬于人為藥理干預(yù)效應(yīng)，并非TLE病理狀態(tài)下的主要機(jī)制。
綜上，D-絲氨酸對(duì)KA誘導(dǎo)的急性癲癇發(fā)作至關(guān)重要：TLE病理狀態(tài)下，D-絲氨酸水平異常升高會(huì)促進(jìn)癲癇發(fā)作；而通過(guò)降解D-絲氨酸(如DAAO)或阻斷其與NMDAR的甘氨酸調(diào)節(jié)位點(diǎn)結(jié)合，可有效發(fā)揮抗癲癇效應(yīng)。
圖1.D-絲氨酸促進(jìn)KA誘導(dǎo)的急性癲癇發(fā)作
02 D-絲氨酸耗竭抑制慢性癲癇發(fā)作
為深入研究D-絲氨酸對(duì)TLE慢性病程的調(diào)控作用，研究人員對(duì)KA誘導(dǎo)的慢性TLE小鼠模型植入硬膜下螺釘電極和海馬注射套管(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖1a)，連續(xù)記錄20小時(shí)腦電圖以獲取基線海馬陣發(fā)性放電(HPDs)后，分別注射相關(guān)試劑進(jìn)行干預(yù)。
結(jié)果顯示：
1.與溶媒組(Vehicle組)相比，注射DAAO降解D-絲氨酸可在后續(xù)12小時(shí)顯著抑制HPDs(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖1b-g)；
2.NMDAR甘氨酸調(diào)節(jié)位點(diǎn)拮抗劑7-CKA同樣能顯著抑制HPDs(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖1h-j)；
3.額外注射D-絲氨酸未增加HPDs頻率(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖1k-m)，推測(cè)可能因TLE小鼠的NMDAR已被內(nèi)源性升高的D-絲氨酸飽和；
4.注射甘氨酸對(duì)HPDs無(wú)明顯影響(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖1n-p)，進(jìn)一步證實(shí)TLE慢性發(fā)作中D-絲氨酸而非甘氨酸是調(diào)控NMDAR活性的關(guān)鍵共激動(dòng)劑。
5.綜上，升高的D-絲氨酸可促進(jìn)TLE慢性癲癇發(fā)作，耗竭D-絲氨酸或阻斷其與NMDAR的結(jié)合具有強(qiáng)效抗慢性癲癇作用，且該效應(yīng)具有特異性。
擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖1.D-絲氨酸調(diào)控自發(fā)性復(fù)發(fā)性癲癇發(fā)作
03 D-絲氨酸耗竭減弱CA2神經(jīng)元癲癇樣放電
嚴(yán)重HS患者的海馬體中，CA2亞區(qū)和齒狀回(DG)的神經(jīng)元丟失程度顯著低于其他區(qū)域，因此CA2亞區(qū)、DG及下托被推測(cè)是癲癇發(fā)作起始和擴(kuò)散的關(guān)鍵區(qū)域。
為明確D-絲氨酸耗竭產(chǎn)生抗癲癇效應(yīng)的神經(jīng)生理學(xué)機(jī)制，研究人員開(kāi)展了針對(duì)性的電生理實(shí)驗(yàn)。
首先對(duì)正常小鼠的海馬腦切片進(jìn)行處理，通過(guò)膜片鉗技術(shù)記錄DG、CA2和下托神經(jīng)元的電活動(dòng)(圖2a)；同時(shí)利用Cre依賴型腺相關(guān)病毒(AAV2-hSyn-DIO-GFP)在Amigo2-Cre小鼠的海馬體中特異性標(biāo)記CA2神經(jīng)元(補(bǔ)充圖2)，為精準(zhǔn)記錄CA2神經(jīng)元電信號(hào)提供基礎(chǔ)。
實(shí)驗(yàn)中，使用特異性阻斷電壓門(mén)控鉀通道的4-氨基吡啶(4-AP)處理腦切片，成功誘導(dǎo)出癲癇標(biāo)志性的細(xì)胞級(jí)表現(xiàn)——陣發(fā)性去極化漂移(PDS)，其特征為神經(jīng)元短暫去極化并引發(fā)一連串動(dòng)作電位(圖2b)。
在此基礎(chǔ)上進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下：
1.向腦切片浴槽中灌流NMDAR甘氨酸調(diào)節(jié)位點(diǎn)拮抗劑7-CKA，可顯著抑制CA2神經(jīng)元的4-AP誘導(dǎo)PDS，洗去7-CKA后抑制效應(yīng)消退(圖2c-e)；
2.灌流DAAO降解D-絲氨酸，同樣能強(qiáng)烈抑制CA2神經(jīng)元的PDS(圖2f-i)；
3.對(duì)比其他腦區(qū)神經(jīng)元：7-CKA和DAAO對(duì)DG神經(jīng)元的PDS僅表現(xiàn)出有限抑制作用(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖2a-d)，對(duì)下托神經(jīng)元的PDS則無(wú)明顯抑制效應(yīng)(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖2e-h)；
4.在KA誘導(dǎo)的慢性TLE小鼠海馬腦切片中，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，得到一致結(jié)果：7-CKA和DAAO仍僅特異性抑制CA2神經(jīng)元的4-AP誘導(dǎo)PDS(圖2k-q)，對(duì)DG和下托神經(jīng)元無(wú)顯著影響(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖2i-p)；
5.補(bǔ)充劑量依賴性實(shí)驗(yàn)：低劑量D-絲氨酸孵育可增強(qiáng)4-AP誘導(dǎo)的CA2神經(jīng)元PDS(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖3a-c)，高劑量D-絲氨酸則抑制該P(yáng)DS(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖3d-f)，與前述腦電圖研究中不同劑量D-絲氨酸對(duì)癲癇發(fā)作的調(diào)控效應(yīng)一致。
圖2.海馬D-絲氨酸耗竭抑制4-AP誘導(dǎo)的CA2區(qū)神經(jīng)元PDS
擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖2.7-CKA和DAAO對(duì)DG和海馬下神經(jīng)元4-AP誘導(dǎo)的PDS的影響有限
擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖3.外源性D-絲氨酸對(duì)4-AP誘導(dǎo)的PDS的影響
04 星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的L-絲氨酸調(diào)控癲癇發(fā)作
研究發(fā)現(xiàn)，正常小鼠和TLE模型小鼠的海馬體中，膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)標(biāo)記的星形膠質(zhì)細(xì)胞均未檢測(cè)到SR信號(hào)(圖3a)，提示星形膠質(zhì)細(xì)胞僅作為L(zhǎng)-絲氨酸產(chǎn)生者。
L-絲氨酸的調(diào)控路徑為：星形膠質(zhì)細(xì)胞通過(guò)丙氨酸-絲氨酸-半胱氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1/2(ASCT1/2)釋放 L-絲氨酸，神經(jīng)元經(jīng) A型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1/2(ATA1/2)攝取后轉(zhuǎn)化為D-絲氨酸，再通過(guò)神經(jīng)元Asc型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1(Asc1)釋放并結(jié)合 NMDAR(圖3b)。
為驗(yàn)證其作用，研究通過(guò)反向微透析向海馬體遞送海人酸(KA)及上述轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑，同時(shí)記錄腦電圖(EEG)并檢測(cè)透析液絲氨酸水平(圖3c-d)。
結(jié)果顯示，KA灌注1小時(shí)可誘導(dǎo)5-7次HPDs(圖3f-g)；聯(lián)合L-4-氟苯甘氨酸(L-4FPG)抑制ASCT1/2可完全阻斷HPDs，補(bǔ)充外源性L-絲氨酸可逆轉(zhuǎn)該抑制作用(圖3h-i)；進(jìn)一步用谷氨酰胺抑制ATA1/2或BMS-466442阻斷Asc1，均再次顯著抑制HPDs(圖3j-k)，組間統(tǒng)計(jì)表明調(diào)控絲氨酸穿梭通路對(duì)癲癇發(fā)作有顯著影響(圖3l)。
透析液檢測(cè)顯示，L-4FPG可阻止KA誘導(dǎo)的L-絲氨酸和D-絲氨酸升高，即使存在L-4FPG，補(bǔ)充外源性L-絲氨酸仍可使D-絲氨酸上升，后續(xù)加入谷氨酰胺或BMS-466442則阻斷該效應(yīng)(圖3m-n)。
綜上，星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的L-絲氨酸通過(guò)絲氨酸穿梭通路，正向調(diào)控間質(zhì)D-絲氨酸水平和癲癇發(fā)作活性。
圖3.星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的L-絲氨酸調(diào)節(jié)D-絲氨酸水平與癲癇發(fā)作
05 PSPH調(diào)控L-絲氨酸水平和癲癇發(fā)作活性
已知L-絲氨酸在星形膠質(zhì)細(xì)胞中由糖酵解中間產(chǎn)物3-磷酸甘油酸經(jīng)三步反應(yīng)合成，依次由PHGDH、PSAT1和PSPH催化(圖4a)。選擇PSPH作為治療靶點(diǎn)的依據(jù)為：敲低PSPH后，細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外L-絲氨酸水平的下降幅度顯著大于敲低PHGDH或PSAT1(圖4b-c、擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖4a-f)；PSPH在海馬體中高表達(dá)(圖4d)。
為驗(yàn)證PSPH表達(dá)與神經(jīng)元活性的關(guān)聯(lián)，向野生型小鼠注射戊四氮(PTZ)誘導(dǎo)海馬體神經(jīng)元激活，Western blot顯示PSPH蛋白水平顯著升高，預(yù)先注射水合氯醛(CH)可完全抑制該上調(diào)(圖4e)，證實(shí)PSPH上調(diào)由神經(jīng)元激活引發(fā)。
TLE患者和慢性TLE小鼠的海馬體星形膠質(zhì)細(xì)胞中，PSPH水平異常升高，而PHGDH和PSAT1水平無(wú)顯著變化(圖4f-g、擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖4g-j)。
通過(guò)AAV5-gfa104-PSPH-IRES-eGFP在正常小鼠海馬體星形膠質(zhì)細(xì)胞中過(guò)表達(dá)PSPH(PSPH OE)，海馬體胞外L-絲氨酸和D-絲氨酸水平顯著升高(圖4i-j)，PSPH OE小鼠更易發(fā)生KA誘導(dǎo)的急性癲癇發(fā)作(圖4k-n)。
相反，通過(guò)AAV5-gfa104-miPSPH-eGFP特異性敲低星形膠質(zhì)細(xì)胞中的PSPH，可降低海馬體胞外L-絲氨酸和 D-絲氨酸水平(圖4o-q)，并減輕PTZ誘導(dǎo)的急性癲癇發(fā)作嚴(yán)重程度(圖4r-u)。
綜上，PSPH是星形膠質(zhì)細(xì)胞中L-絲氨酸從頭合成的關(guān)鍵調(diào)控因子，靶向PSPH可通過(guò)降低絲氨酸水平減少癲癇發(fā)作。
圖4.PSPH在TLE中上調(diào)，并調(diào)節(jié)細(xì)胞外L-絲氨酸和D-絲氨酸以及癲癇發(fā)作
擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖4.TLE中PHGDH和PSAT水平未發(fā)生變化
06 PSPH抑制劑的鑒定與表征
已知PSPH是星形膠質(zhì)細(xì)胞L-絲氨酸從頭合成的關(guān)鍵調(diào)控因子，但強(qiáng)效抑制劑尚未明確。研究通過(guò)高通量虛擬篩選(HTVS)，從216萬(wàn)余個(gè)化合物中篩選出20個(gè)候選物，體外酶活性實(shí)驗(yàn)證實(shí)4種可劑量依賴性抑制PSPH活性(圖5a-d、擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖5a)。
在PTZ誘導(dǎo)的急性癲癇模型中，僅Z218484536表現(xiàn)出劑量依賴性抗癲癇效應(yīng)，4mg/kg劑量時(shí)效果最佳(圖5e-g)；其余3種化合物無(wú)活性，而PHGDH抑制劑NCT-502的陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果，支持靶向絲氨酸合成通路的治療潛力(圖5h-p、補(bǔ)充圖3a-f)。
進(jìn)一步表征顯示，Z218484536與PSPH的A51、D22等位點(diǎn)形成多重相互作用，微量熱泳動(dòng)(MST)分析證實(shí)其解離常數(shù)(Kd)約0.23μM，為競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑(圖5q、擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖5b-c)。該藥藥代動(dòng)力學(xué)特性良好，腹腔注射4mg/kg后血漿暴露充分、半衰期2.7h，腦-血漿比0.33(可穿透血腦屏障)，且安全性優(yōu)異(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖5d-m)。
體外實(shí)驗(yàn)中，Z218484536抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞 L-絲氨酸釋放及胞內(nèi)合成的IC50分別為0.4μM和0.38μM(圖5r-s)；在KA-TLE小鼠模型中，連續(xù)腹腔注射可顯著降低海馬體L-絲氨酸和D-絲氨酸水平，且不影響外周血清氨基酸水平(圖5t-u、擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖5n-o)。
綜上，Z218484536與PSPH結(jié)合親和力強(qiáng)、血腦屏障穿透性好，體內(nèi)外均能有效降低絲氨酸水平且安全性良好，是潛在抗癲癇候選化合物。
圖5.虛擬篩選和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證確定了新的PSPH抑制劑
擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖5.Z218484536的分子對(duì)接、藥代動(dòng)力學(xué)(PK)及毒理學(xué)數(shù)據(jù)
07 Z218484536的靶點(diǎn)選擇性
為驗(yàn)證PSPH抑制劑Z218484536的特異性及無(wú)脫靶效應(yīng)，研究開(kāi)展多維度驗(yàn)證：
位點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)顯示，Z218484536結(jié)合的PSPH氨基酸位點(diǎn)(D22、K158等)高度保守(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖6a)；關(guān)鍵位點(diǎn)突變后，PSPH活性顯著改變，且Z218484536與突變型PSPH的結(jié)合親和力下降26倍，對(duì)L-絲氨酸的抑制作用消失(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖6b-f)。
靶標(biāo)代謝組學(xué)分析表明，Z218484536僅影響7種代謝物，僅降低L-絲氨酸、甘氨酸水平并蓄積O-磷酸-L-絲氨酸，無(wú)廣泛代謝紊亂(補(bǔ)充圖4a-i)；蛋白質(zhì)組學(xué)顯示其與PHGDH抑制劑分子作用不同，無(wú)共同靶點(diǎn)(補(bǔ)充圖4j-m)。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，沉默PSPH后Z218484536的抗癲癇效應(yīng)消失，且該效應(yīng)可被預(yù)注射D-絲氨酸阻斷(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖6k-n)；其光親和探針無(wú)法結(jié)合PSPH(補(bǔ)充圖5a-e)。
磷酸酶面板檢測(cè)顯示，Z218484536僅在30μM時(shí)微弱抑制DUSP22，對(duì)其他24種磷酸酶無(wú)作用(補(bǔ)充圖6)。
綜上，Z218484536對(duì)PSPH具有高度選擇性，通過(guò)特異性結(jié)合降低L-絲氨酸和D-絲氨酸水平，無(wú)明顯脫靶效應(yīng)。
擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖6.Z218484536的靶向結(jié)合
08 Z218484536抑制TLE小鼠的自發(fā)性癲癇發(fā)作
已知Z218484536在體外和急性模型中有效，需驗(yàn)證其對(duì)慢性TLE小鼠自發(fā)性癲癇的抑制作用及安全性。研究利用KA-TLE小鼠模型，KA誘導(dǎo)4周后 ，植入有線腦電圖電極監(jiān)測(cè)自發(fā)性臨床電癲癇發(fā)作(SESs)(圖6a-e)。先記錄3周基線SES頻率，隨后進(jìn)行7周載體、拉莫三嗪(LTG)或Z218484536處理(圖6b-e)。
結(jié)果顯示，載體組SES頻率漸進(jìn)升高(圖6b, f, g)；LTG組第1周顯著降低SES頻率，但效力逐漸下降(圖6c, f, h)；Z218484536可阻止SES頻率升高但仍高于基線(圖6d, f, i)，而4mg kg?1 劑量可將SES頻率降至0.44±0.15次/天，較基線降低75%(圖6e, f, j)。
安全性方面，LTG和Z218484536(4mg kg?1)均不導(dǎo)致小鼠體重下降(圖6k)；Z218484536(4mg kg?1)處理組小鼠的肝腎功能損傷血清生物標(biāo)志物(AST、ALT、BUN、肌酐)水平與溶媒組無(wú)顯著差異(圖6l-o)。
綜上，Z218484536可有效抑制慢性TLE小鼠的自發(fā)性癲癇發(fā)作，且安全性良好，有望成為T(mén)LE的長(zhǎng)期治療干預(yù)手段。
圖6.Z218484536在慢性顳葉癲癇(TLE)KA小鼠模型中具有抗癲癇作用
09 Z218484536抑制TLE食蟹猴模型的癲癇棘波
已知食蟹猴TLE模型更貼近人類病理特征，且海馬注射KA誘導(dǎo)的慢性癲癇狀態(tài)無(wú)明顯驚厥癥狀，故以癲癇棘波頻率作為抗癲癇活性評(píng)估指標(biāo)(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7a)。
研究選用6只食蟹猴，建立KA-TLE模型；最后一次KA注射1個(gè)月后，記錄腦電圖以確定基線癲癇棘波頻率(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7b)，三次基線記錄顯示棘波頻率均穩(wěn)定(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7c)。
隨后猴子每日腹腔注射溶媒或Z218484536，治療2周后首次評(píng)估療效，后續(xù)每月復(fù)查一次。
結(jié)果顯示，溶媒組全程癲癇棘波頻率無(wú)降低(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7d)；按種間劑量換算，初始給予1mg?kg?1Z218484536 2周后，棘波頻率較基線略有下降(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7e)；劑量增至2mg?kg?1后，至3.5個(gè)月時(shí)棘波頻率較基線降低80%(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7e)。注射后1小時(shí)，Z218484536的平均血漿濃度為254.8ng/ml(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7f)。
綜上，Z218484536可有效降低TLE食蟹猴模型的癲癇活性，為其作為人類TLE潛在治療藥物提供了有力的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證據(jù)。
擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖7.Z218484536在顳葉癲癇(TLE)食蟹猴模型中抑制癲癇放電
研究結(jié)論
本研究明確D-絲氨酸及其前體L-絲氨酸在TLE中起關(guān)鍵作用，通過(guò)遺傳和藥物遺傳學(xué)抑制手段，證實(shí)降低星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的L-絲氨酸水平可發(fā)揮抗癲癇效應(yīng)，同時(shí)確定PSPH為抗癲癇治療的潛在核心靶點(diǎn)。
體外與體內(nèi)研究表明，Z218484536是具有前景的先導(dǎo)化合物，需進(jìn)一步優(yōu)化其效力、選擇性及藥代動(dòng)力學(xué)特征，有望成為T(mén)LE的新型治療藥物。
AQ700高通量靶標(biāo)定量：是一種高通量靶標(biāo)代謝組學(xué)分析方法，可檢測(cè)15類的600多種代謝物，涵蓋生物體內(nèi)關(guān)鍵代謝通路核心代謝物、腸道菌群相關(guān)代謝物以及文獻(xiàn)中報(bào)道的生物標(biāo)志物。這些代謝物在生理穩(wěn)態(tài)維持、病理機(jī)制調(diào)控等多種健康與疾病狀態(tài)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。AQ700采用高靈敏度的三重四極桿質(zhì)譜儀，能夠在較短時(shí)間內(nèi)對(duì)樣本中600多種代謝物進(jìn)行精準(zhǔn)、快速的定性與定量分析，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本代謝譜的全面解析。
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干貨分享 | 5min帶你認(rèn)識(shí)簡(jiǎn)單好用的通路數(shù)據(jù)庫(kù)——ReactomeReactome數(shù)據(jù)庫(kù)交叉引用了100多個(gè)不同的在線生物信息學(xué)資源，包括NCBI、Ensembl和UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)、UCSC基因組瀏覽器、ChEBI小分子數(shù)據(jù)庫(kù)和PubMed文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)等。2023-08-23 -
科研加速寶典 | 跟著CNS學(xué)習(xí)腸菌研究策略“腸道菌群與人體健康關(guān)系的研究”被列入 Science 雜志報(bào)道的十大科學(xué)進(jìn)展，對(duì)腸道菌群的研究早已成為科學(xué)熱點(diǎn)之一。2023-08-23
