產品介紹
平行反應監測(parallel Reaction Monitoring, PRM)是一種與MRM技術類似的靶向檢測方法，兩者不同之處在于PRM使用高分辨的質譜儀(Q Orbitrap/Q TOF)，能顯著降低背景雜質干擾，提高檢測的選擇性和特異性。能夠對目標蛋白質、目標肽段（或發生翻譯后修飾的肽段）進行選擇性檢測，從而實現對目標蛋白質/肽段進行相對（絕對）定量。PRM技術基于Orbitrap為代表的高分辨、高精度質譜平臺，首先利用四級桿質量分析器的選擇能力，用Q1選擇目標肽段的母離子，隨后在collision cell 中對母離子進行碎裂，最后利用Orbitrap分析器在二級質譜中檢測所選擇的母離子窗口內的所有碎片信息。這樣即可對復雜樣本中的目標蛋白質/肽段進行準確地特異性分析，可實現相對定量（目的同WB）/絕對定量（目的同Elisa）分析。
技術優勢
? 超高靈敏度：可檢測阿托摩爾級痕量分子，適配復雜生物樣本低豐度分析
? 高特異性：精準排除背景干擾，減少假陽性
? 寬動態范圍：4-6 個數量級線性定量，覆蓋高低濃度分子
? 定性定量一體：二級譜圖支持結構驗證，同步完成定量
? 無抗體依賴：規避抗體相關問題，適配稀缺抗體 / 特殊物種蛋白
? 高通量高效：單次可定量數十至上百個目標，降本提效
? 高可靠可重復：標準化流程保障結果準確，適配大規模研究
? 廣樣本兼容：適用于各類生物樣本，流程簡單
樣本要求
動物組織標本 | 50 mg/sample |
血清、血漿 | 100 μL/sample |
細胞、微生物 | 1×10^7 cells/sample |
液氮或-80°C保存
足量干冰運輸，避免反復凍融
檢測平臺
Tims TOF Pro2, Bruker
應用方向
? 驗證修飾和非修飾定量蛋白組學結果
? 目標蛋白/肽段相對定量和絕對定量分析
案例應用
英文標題：Identification of a Blood-Based Protein Biomarker Panel for Lung Cancer Detection
發表期刊：Cancers
影響因子：6.126
技術方法：PRM 技術
研究內容：肺癌是世界上最致命的癌癥，主要是由于它在診斷時處于晚期。非侵入性的早期檢測方法仍然是提高患者生存率的必要手段。本文采用液相色譜-平行反應監測(LC-PRM)質譜法測定128例肺癌患者和93例健康獻血者血漿中351種蛋白質的水平，通過生信分析尋找最佳蛋白組合用于預測。確定了血漿中6個蛋白質作為肺癌的潛在診斷工具，并在48名患者和49名健康志愿者中得到驗證。作為高風險和中等風險人群的常規檢查，它可以補充目前在肺癌篩查中采用的技術。
英文標題：Divergent responses of Atlantic coastal and oceanic Synechococcus to iron limitation
發表期刊：Proc Natl Acad Sci U S A
影響因子：9.412
技術方法：Label free蛋白質、PRM靶向蛋白組
研究內容：海洋聚球藻是種類最豐富、分布最廣的浮游植物之一，而鐵(Fe)是一種重要的微量營養素，限制了海洋許多地區的生產力。為了研究沿海和海洋大西洋聚球藻菌株如何適應鐵的有效性，我們比較了來自不同鐵環境的兩個聚球藻菌株的生長、光生理學和定量蛋白質組學。聚球藻菌株WH8102來自馬尾藻海南部的一個區域，該區域有大量的灰塵沉積，隨著鐵含量的下降，其生長和光生理學表現出受損，但很少使用馴化反應。來自動態、季節性變化的新英格蘭大陸架的沿海WH8020顯示了具有不同鐵閾值的多層次、分級的適應反應級聯。多層次的反應包括鐵的獲取、儲存和光合蛋白質的變化，黃氧毒素替代鐵氧還蛋白，以及改良的光生理學，同時在一定范圍內保持顯著穩定的生長速率。
技術路線：
研究成果：
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