產品介紹
利用液相色譜質譜聯用技術(LC-MS/MS)結合數據庫檢索的方法，對樣本中的混合蛋白進行定性鑒定分析。
技術優勢
? 高準確性：經 SDS-PAGE 按分子量分離蛋白質，減少復雜混合物干擾，提升低豐度蛋白鑒定精準度。
? 靶向性強：可按需切取目標條帶，聚焦特定蛋白 / 蛋白復合物，無需全混合物分析。
? 兼容普適：適配細胞裂解液、組織提取物等多種樣品，變性 / 非變性膠條均可適用。
? 靈敏度高：結合質譜高靈敏特性與膠條富集效果，可檢測微克至納克級微量蛋白。
? 功能拓展：能鑒定磷酸化、乙酰化等翻譯后修飾，助力蛋白功能調控機制研究。
? 結果可靠：鑒定結果可通過 Western Blot、免疫沉淀等方法驗證，排除假陽性。
樣本要求
膠條樣本
考馬斯亮藍染色SDS-PAGE凝膠，條帶清晰可見
條帶切取操作過程中佩戴手套，防止角蛋白污染
條帶置于EP管中，-20℃保存，冰袋運輸
檢測平臺
Tims TOF Pro2, Bruker
應用方向
? Pull-down、Co-IP產物的質譜分析
? 蛋白混合物的SDS-PAGE膠內酶解(in-gel digestion)的質譜分析
案例應用
? 醫學方向
英文標題：Proteomics Analysis of Formalin Fixed Paraffin Embedded Tissues in the Investigation of Prostate Cancer
發表期刊：Journal of Proteome research
影響因子：4.074
技術方法：SDS-PAGE +LC-MS/MS
研究內容：福爾馬林固定石蠟包埋(formalin fixation and paraffin embedding, FFPE)組織是大規模研究的寶貴資源，但由于蛋白質的交聯，其在蛋白質組學中的應用受到了限制。本研究對FFPE組織蛋白質組學分析方案進行了優化，并在FFPE-前列腺癌(PCa)臨床標本上進行了初步應用。使用七種蛋白質提取方案處理FFPE小鼠組織，利用SDS電泳和高分辨率LC-MS/MS對蛋白質組的提取效果進行評價。然后對FFPE和匹配的新鮮冷凍(FF)組織樣本使用優化的方案處理分析，結果表明蛋白質鑒定有大量重疊，且相對豐度有很強的相關性(rs=0.819，p＜0.001)。對10例PCa患者及鄰近良性病變的FFPE組織進行處理分析，發現蛋白質在癌組織和癌旁良性組織之間的調節失控，反映了前者的翻譯、肽合成和蛋白質代謝的增加，這與文獻相符。綜上所述，這些結果支持蛋白質組學在PCa背景下的相關性發現以及優化的FFPE材料蛋白質組學分析方案的可靠性。
? 農學方向
英文標題：Identification and Quantification of Major Faba Bean Seed Proteins
發表期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry
影響因子：4.192
技術方法：蛋白定性鑒定
研究內容：蠶豆(Vicia Faba L)因其蛋白質含量高而在人類和動物營養中占有重要地位。然而，需要更好地了解其種子蛋白質組成，才能開發出滿足市場對具有特定品質屬性的植物蛋白質需求的品種。在本研究中，作者使用一維電泳(1D SDS-PAGE)篩選了35種不同的蠶豆基因型，對三個基因型的35條主要蛋白帶進行了質譜分析。MS分析表明，大多數分析的蛋白質條帶包含一種以上的蛋白質類型，總共鑒定出100多種蛋白質。這些蛋白質包括主要的種子貯藏蛋白，如豆科蛋白以及其他蛋白質類，如脂氧合酶、熱休克蛋白、蔗糖結合蛋白、白蛋白和防御素。本文介紹的種質資源和篩選方法有望有助于選擇高蛋白質含量和高質量的品種。
研究成果：
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定性鑒定蛋白質組學綜合解決方案，數據分析軟件，質譜檢測技術及介紹，全面的聯用技術等。
